Rambler's Top100 Service
Поиск   
 
Обратите внимание!   BOAI: наука должна быть открытой Обратите внимание!
 
  Наука >> Медицина >> Профилактика | Научные статьи
 Написать комментарий  Добавить новое сообщение
 См. также

Научные статьиКальципотриол новое патогенетическое направление в терапии псориаза: Кальципотриол - новое патогенетическое направление в терапии псориаза

Иммунизация мышей референтной вакциной на ранней стадии развития чумной инфекции обеспечивает выживание части животных и увеличивает среднюю продолжительность их жизни на 2-5 суток. Фторхинолоны ципрофлоксацин, офлоксацин и пефлоксацин препятствуют формированию поствакцинального иммунитета у белых мышей, иммунизированных эталонным вакцинным штаммом EV. Налидиксовая кислота и норфлоксацин в меньшей степени влияют на поствакцинальный иммунитет. Применение иммуногенного штамма EV Nalr (устойчив к налидиксовой кислоте и фторхинолонам) обеспечивает формирование противочумного иммунитета на фоне профилактического применения всех хинолонов. Ципрофлоксацин, офлоксацин и пефлоксацин, использованные для профилактики чумы у зараженных Yersinia pestis (~1000 ЛД50) белых мышей, подавляют развитие постинфекционного иммунитета. Налидиксовая кислота и норфлоксацин таким действием не обладают. Сочетанная специфическая (EV Nalr) и экстренная профилактика фтopxинoлoнами характеризуется более высокой эффективностью в сжатые сроки (5 дней) и обеспечивает формирование противочумного иммунитета.

Ключевые слова:

экспериментальная чума, специфическая (EV Nalr) профилактика, экстренная антибиотикопрофилактика, хинолоны.

Одним из первоочередных мероприятий по ограничению и ликвидации очага чумы является проведение курса экстренной профилактики антибактериальными препаратами широкого спектра действия, преимущественно для перорального применения. Для полной ликвидации очага дополнительно требуется создание "иммунной прослойки" среди людей, чтобы предотвратить распространение инфекции. Однако, в связи с чувствительностью к антибактериальным препаратам коммерческой живой чумной вакцины из штамма EV линии НИИЭГ, иммунизация ею предусмотрена через два дня после окончания курса экстренной профилактики [1]. Если учесть, что для некоторых антибиотиков (ампициллин, доксициклин) рекомендованный курс профилактического применения составляет 7 дней при 6-суточном сроке изоляции потенциально инфицированных, то сложности организационного плана становятся очевидными.

Концепция преимущественного проведения в эпидочаге комбинированной специфической и экстренной антибиотикопрофилактики [2] применительно к чуме в настоящее время близка к реализации благодаря разработке полиантибиотикорезистентной и химической [3-5] вакцин, в связи с чем апробация схем использования антибактериальных препаратов одновременно с иммунизацией представляется необходимой.

Одной из перспективных групп химиопрепаратов, высокоэффективных при профилактике и лечении чумы, являются фторхинолоны (ципрофлоксацин, пефлоксацин, норфлоксацин, офлоксацин), имеющие формы для применения внутрь [6, 7], хотя и для этой группы препаратов рекомендованный курс профилактики составляет 7 дней. Оценка их влияния на поствакцинальный и постинфекционный иммунитет, а также эффективности комбинированной специфической и экстренной профилактики способствовала бы совершенствованию тактики проведения одного из важнейших мероприятий при ликвидации очага чумы, что и явилось целью настоящего исследования.

Материал и методы

Штаммы: высоковирулентный (ЛД50 5-10 микр. клеток) штамм Yersinia pestis 231; эталонный вакцинный штамм EV, его иммуногенный вариант, устойчивый к налидиксовой кислоте и фторхинолонам (EV Nalr).

Антибактериальные препараты: налидиксовая кислота (НК) - невиграмон ("Хиноин", Венгрия); ципрофлоксацин (ЦФ) - квинтор ("Вауег", Германия); пефлоксацин (ПФ) (ГНЦА, Москва); офлоксацин (OФ) - таривид ("Hоесhst", Германия); норфлоксацин (HФ) - нолицин ("KRKA", Словения). Препараты использовали в дозах, соответствующих среднесуточным для человека [8].

Методы. В опытах использовали беспородных белых мышей массой 18-20 г. Значения ЭД50 и ЛД50 определяли по методу Кербера [9]; индекс защиты (ИЗ) рассчитывали по отношению значений ЛД50 в опыте к значению ЛД50 в контроле (неиммунизированные, нелеченые животные). Статистическую обработку проводили по таблицам А.Я. Боярского [10] и по критерию знаков [9]. Определение чувствительности (устойчивости) штаммов чумного микроба к хинолонам проводили методом серийных разведении препаратов в плотной питательной среде (агар Хоттингера, рН 7,2) при посевной дозе 107 микробных клеток/мл.

Результаты и обсуждение

В настоящей работе мы попытались смоделировать ситуацию, при которой вакцинация при чуме может быть проведена в ранние сроки после заражения без предварительного курса профилактики антибиотиками. В 6 независимых экспериментах иммунизация мышей культурой эталонного штамма EV (106 микр. кл., подкожно) через 5 ч после инфицирования ~1000 ЛД50 вирулентного штамма Y.pestis 231 обеспечивала выживание 20-60% животных при 100% гибели контрольных, а также увеличение средней продолжительности жизни на 2-5 суток (достоверность различий в опыте и контроле по критерию знаков - 95-97,5%). Полученные результаты свидетельствуют о положительном влиянии иммунизации в ранние сроки после заражения на исход инфекционного процесса и, по-видимому, о целесообразности проведения в экстремальной ситуации вакцинации лиц, не имеющих признаков заболевания, даже если они находятся в инкубационном периоде.

Сочетание экстренной профилактики антибиотиками и иммунизации чумной живой вакциной считается нецелесообразным, так как этиотропная терапия чумы приводит к гибели чумного микроба, снижению антигенного раздражения и подавлению формирования иммунитета. В связи с этим нами был получен иммуногенный вариант штамма EV с хромосомной устойчивостью к НК (EV Nalr), обладающий перекрестной устойчивостью к представителям нового поколения хинолонов - фторхинолонам (ЦФ, ОФ, НФ, ПФ). Степень резистентности клеток EV Nalr к перечисленным препаратам, характеризуемая величиной их МПК, составляла соответственно 400; 1,6; 3,2; 3,2 и 3,2 мг/л при значениях МПК в отношении эталонного штамма EV - 2,0; 0,025; 0,25; 0,25 и 0,25 мг/л соответственно.

В табл. 1 дана сравнительная характеристика формирования поствакцинального иммунитета у белых мышей, иммунизированных суспензиями суточных агаровых культур эталонного штамма EV и его варианта EV Nalr в дозах, равных 200- 1000-5000-25000 микр. кл. (согласно рекомендациям ФС 42-326 ВС-92 на вакцину чумную живую сухую), на фоне одновременно начатого лечения хинолонами (5 дней). Контрольное заражение животных осуществляли Y.pestis 231 в дозе 104 микр. кл. (1000 ЛД50 через 21 день после иммунизации и начала терапии).

Таблица 1. Влияние хинолонов на формирование поствакцинального иммунитета у белых мышей к чуме (штаммы EV эталонный и EV Nalr)
Иммунизирующий штамм Препарат, доза, мг/кг/сут Kонтрольное заражение, N штамма, микр. кл. Значение ЭД50, KОЕ
EV эталонный Без лечения 231, 104 1462
НK, 250 То же 9559
НФ, 50 - " - 12500
ОФ, 50 - " - >25000
ПФ, 50 - " - >25000
ЦФ, 25 - " - >25000
EV Nalr Без лечения 231, 104 1307
НK, 250 То же 2717
НФ, 50 - " - 3269
ОФ, 50 - " - 5590
ПФ, 50 - " - 2236
ЦФ, 25 - " - 5520
Kонтроль Интактные животные 231, 101-102-103-104 ЛД50 5 микр. кл.
Примечание: препараты начинали вводить одновременно с иммунизацией, внутрь, в течение 5 дней.

Эксперименты показали, что иммуногенность штамма EV Nalr по значениям ЭД50 не отличалась от иммуногенности эталонного штамма EV. Лечение НК и НФ, начатое одновременно с вакцинацией антибиотикочувствительным штаммом, не влияло на формирование определенной степени защиты животных, тогда как на фоне лечения ЦФ, ОФ и ПФ даже максимальная иммунизирующая доза (25000 микр. кл.) не обеспечивала выживания белых мышей после контрольного заражения. В то же время устойчивый к хинолонам штамм EV Nalr формировал у привитых животных иммунитет на фоне применения всех препаратов (значения ЭД50 меньше 104 микр. кл.), что свидетельствует о возможности его использования для целей сочетанной специфической и экстренной профилактики чумы.

Далее...


Написать комментарий
 Copyright © 2000-2015, РОО "Мир Науки и Культуры". ISSN 1684-9876 Rambler's Top100 Яндекс цитирования