Rambler's Top100 Service
Поиск   
 
Обратите внимание!   Обратите внимание!
 
  Наука >> Медицина >> Лабораторная и функциональная диагностика | Научные статьи
 Написать комментарий  Добавить новое сообщение

Гистохимические исследования слизистых оболочек урогенитального тракта при папилломавирусной инфекции

Г.М. Цветкова, И.И. Богатырева, А.Р. Карев

Центральный кожно-венерологический институт, Москва

В начало...


Изучены биоптаты 21 больного с остроконечными и папиллярными разновидностями кондилом при помощи патоморфологических и гистохимических методов. Во всех случаях обнаружены признаки койлоцитарной атипии. Койлоцит - пустая клетка, возникающая в результате патогенного воздействия вируса папилломы человека (ВПЧ), является морфологическим маркером этой патологии. В межклеточных промежутках обнаружены зернистые включения, являющиеся продуктом жизнедеятельности ВПЧ в клетке. В 30% случаев среди пролиферирующих клеток определяются высокая митотическая активность, признаки ядерной и клеточной атипии, патологические митозы, что может свидетельствовать о возможной малигнизации новообразований, индуцированных ВПЧ.

Ключевые слова:

кондиломы остроконечные, клинические формы, патоморфология.

Поражения вирусом папилломы человека (ВПЧ) представляют большой научный интерес для специалистов различного профиля: дерматовенерологов, гинекологов, урологов, онкологов, так как многие из свыше 60 выделенных в настоящее время типов ВПЧ вызывают опухолевые поражения на коже и слизистых оболочках, в том числе и злокачественные [1].

E. Grubendorf-Gonen (1985) показал, что 20% различных форм рака у женщин и 10% у мужчин возникают в связи с предшествующим заражением папилломавирусом.

Однако несмотря на интенсивное изучение воздействия ВПЧ на ткани организма человека, в основном зарубежными исследователями [4, 6], достаточной ясности в плане клинико-морфологической диагностики нет.

В связи с изложенным представляется необходимым изучить более подробно клинико-морфологические проявления ВПЧ-инфекции, в частности гистохимические изменения в очагах поражения, с целью более детального изучения цитопатического эффекта в развитии этой инфекции.

Нами изучены биоптаты генитальных вирусных папиллом у 21 больного в возрасте от 17 до 43 лет, в том числе у 3 с остроконечными кондиломами и у 18 с папилломатозной формой кондиломы. Среди больных последней группы у 12 папилломатозные разрастания сопровождались воспалительной реакцией в строме, у 6 - воспалительной реакции не отмечалось. Кроме того, у 7 больных этой группы мы обнаружили полиморфизм ядер эпителиоцитов и высокую митотическую активность.

Парафиновые срезы биоптатов окрашивали гематоксилином и эозином, толуидиновым синим с обработкой контрольных срезов гиалуронидазой с целью выявления гликозаминогликанов, по Браше с обработкой контрольных срезов рибонуклеазой для выявления РНК, по Фейльгену с целью выявления ДНК, по Хочкиссу и Мак-Манусу для обнаружения гликогена и нейтральных мукополисахаридов (МПС) с обработкой контрольных срезов диастазой.

В группе больных с остроконечными кондиломами гистологическое исследование биопсийного материала выявило резко выраженный акантоз, папилломатоз, гиперпаракератоз. В шиповатом слое, особенно в его верхних отделах, отмечались явления дискератоза и койлоцитарная метаплазия различной степени выраженности. Гранулы зернистых клеток мелкие, местами располагались в межклеточных промежутках. Базальный слой, как правило, многорядный, ядра базальных клеток большей частью овальной формы местами гиперхромные. Выявлялись фигуры митозов, среди которых встречались патологические. Базальная мембрана в отдельных местах выражена нечетко. В строме, как правило, обнаруживалось большое количество резко расширенных сосудов с набухшим эндотелием, воспалительная реакция в виде наличия очаговых лимфогистиоцитарных инфильтратов с примесью единичных плазматических клеток.

Гистохимическое исследование показало, что гликозаминогликаны как в клетках эпидермиса, так и в различных структурах стромы (сосуды, коллагеновые волокна) не выявлялись, и лишь в одном случае в клетках базального слоя отмечалось наличие небольшого количества хондроитинсульфатов.

В клетках шиповатого слоя, особенно в его верхних отделах, обнаруживался в большом количестве гликоген. В койлоцитах он большей частью не выявлялся или в небольшом количестве располагался в периферических отделах цитоплазмы этих клеток. Не выявлялся он также в клетках базального слоя.

Базальная мембрана почти не содержала нейтральных МПС, они выявлялись лишь в стенках некоторых сосудов и коллагеновых волокнах.

Содержание ДНК в ядрах клеток эпидермиса неравномерное. В значительном количестве ДНК выявлялась в паракератотических клетках, а также в гиперхромных ядрах шиповатого слоя. В ядрах койлоцитов и дискератотических клеток содержание ДНК было значительно меньшим, а местами она отсутствовала вовсе (рис.1). Значительное содержание РНК отмечалось в цитоплазме клеток базального слоя и паракератотических клеток. В шиповатом слое, при окраске по Браше, наблюдалось лишь диффузное окрашивание, а в койлоцитах РНК отсутствовала (рис.2). В строме РНК выявлялась в большом количестве в гистиоцитах, плазматических клетках и эндотелиоцитах.

Рис.1. Остроконечная кондилома. Различное содержание ДНК в клетках эпидермиса. Окраска по Фейльгену. x100.

Рис.2. Остроконечная кондилома. Значительное содержание РНК в клетках базального слоя и почти полное ее отсутствие в койлоцитах. Окраска по Браше. x100.

При папилломатозной форме кондилом в отсутствие воспалительной реакции в строме отмечались резко выраженные акантоз, папилломатоз, гиперпаракератоз. В верхних отделах эпидермиса, непосредственно под роговым слоем обнаруживались койлоциты, ядра которых находились большей частью в состоянии пикноза или лизиса. Встречались группы дискератотических клеток с ярко-розовой цитоплазмой, нечеткими границами и бледноокрашенными ядрами. Базальный слой, как и в предыдущей группе, многорядный, ядра базальных клеток удлиненной или овальной формы, иногда гиперхромные, втречаются фигуры митоза. Базальная мембрана большей частью четкая. В строме - отек, большое количество резко расширенных сосудов, преимущественно венозного и лимфатического типа.

При гистологическом исследовании выявлялось большое количество гликогена почти во всех клетках шиповатого слоя, включая и койлоциты, где он располагался в периферических частях их цитоплазмы.

В базальном слое гликоген не обнаруживался. Нейтрофильные МПС выявлялись в обычном количестве в базальной мембране эпидермиса и стенках сосудов.

Гликозаминогликаны не выявлялись ни в клетках эпидермиса, ни в структурах стромы.

Содержание ДНК в ядрах клеток базального слоя было повышено, в шиповатом слое - понижено, а в койлоцитах ДНК не выявлялась.

Содержание РНК было значительным в цитоплазме клеток многорядного базального слоя, умеренным в шиповатых клетках, РНК отсутствовала в дискератотических клетках и койлоцитах.

В случаях папилломатозных кондилом с воспалительной реакций в строме изменения в эпидермисе были аналогичны описанным выше. Однако строма в этих случаях резко отечна, сосуды ее расширены, особенно лимфатические. Вокруг сосудов располагались лимфогистиоцитарные инфильтраты с примесью нейтрофильных и эозинофильных гранулоцитов, а в некоторых случаях - небольшое количество плазматических клеток.

Гистохимическая характеристика клеток эпидермиса аналогична таковой в вышеописанных группах. Однако при окраске толуидиновым синим выявлялись кислые МПС типа хондроитинсульфата в клетках многорядного базального слоя, а также в строме, вокруг расширенных сосудов. Примечательно, что в отдельных клетках эпидермиса, а также между ними обнаруживались крупные ШИК-положительные гранулы.

В строме выявлялось значительное содержание РНК в плазматических клетках и гистиоцитах, а в ядрах лимфоцитов - ДНК. В отдельных случаях выявлялись в значительном количестве тучные клетки в состоянии дегрануляции сg-метахромазией их гранул.

В случаях папилломатозных кондилом с явлениями полиморфизма клеток эпидермиса и повышенной митотической активностью, особенно в клетках многорядного базального слоя, как правило, были более выражены акантоз, папилломатоз и удлинение эпидермальных выростов за счет усиленной пролиферативной активности этих папиллом. Отмечались выраженный гиперпаракератоз и большое количество койлоцитов с пикнотичными ядрами, дискератотические клетки. В отдельных местах видны явления межклеточного отека и экзоцитоз.

Местами в межклеточных промежутках определялись мелкогранулярные образования слабобазофильной окраски. Клетки многорядного базального слоя, как правило, отличались полиморфизмом, встречались двуядерные клетки и ядра больших размеров (рис.3). Митотическая активность повышена, отмечались патологические митозы. Базальная мембрана не везде четко выражена, иногда размыта клетками инфильтрата. Строма во всех случаях резко отечна, отмечены пролиферация сосудов и воспалительная реакция, выраженная в различной степени. Воспалительные инфильтраты лимфоцитарного характера с примесью нейтрофильных и эозинофильных гранулоцитов. В некоторых случаях выявлялись группы плазматических клеток.

Рис.3. Папилломатозная форма кондиломы. Полимор-физм ядер клеток базального слоя и повышенная ми-тотическая активность его. Окраска гематоксилином и эозином. x160.

Гистохимическая характеристика эпидермиса и стромы аналогична таковой в вышеописанной группе.

Проведенные гистологические и гистохимическое исследования эпидермиса и стромы различных форм генитальных вирусных папиллом показали, что общим для них являются акантоз, папилломатоз, гиперкератоз и дискератоз в различных сочетаниях, а также пролиферация клеток базального слоя.

Всегда при этом присутствует койлоцитарная атипия клеток, обусловленная, по мнению авторов [3, 5], цитопатическим действием вирусов папиллом.

Койлоцит является специфической клеткой для этой инфекции [2] и представляет собой деструктивно измененный эпителиоцит с резко пониженным метаболизмом. Об этом свидетельствуют и соответствующие гистохимические сдвиги в нем, выражающиеся в почти полном отсутствии в его цитоплазме РНК, гликогена, а в ядрах - ДНК. Местами он превращается почти полностью в баллоноподобные клетки.

В 30% наблюдений нами обнаружены среди пролиферирующих клеток многоядерного базального слоя значительный полиморфизм ядер, наличие двуядерных клеток и высокая митотическая активность, сопровождающиеся увеличением содержания РНК в цитоплазме этих клеток, а в ядрах - ДНК. Гликоген, как правило, здесь не обнаруживался, что указывает на его усиленный синтез растущими клетками базального слоя. Подобные изменения в последующем могут явиться основой озлокачествления этого процесса.


Вестник дерматологии и венерологии, N 4-1998, стр. 8-10.

Литература

1. Скрипкин Ю.К., Кубанова А.А., Богатырева И.И., Самсонов В.А. и др. Папилломавирусная инфекция урогенитального тракта: диагностика и комбинированный метод лечения. Метод. рекомендации. М 1986;8.

2. Alvarez S. Rev Obstet Ginec Vener 1988;48:3:124-125.

3. Bodo M., Dobrossy L. Fortschr Onkol 1987;14:71-78.

4. Grubendorf-Gonen E.J. Z Hautkr 1985;60:24:1970-1974.

5. Gupta J.W., Gupta P.K., Rosenshein N., Shah K.V. Acta Cytol 1987;36:1:1-5.

6. Kremsdorf D. et al. J Virol 1984;52:3:1013-1018.


Написать комментарий
 Copyright © 2000-2015, РОО "Мир Науки и Культуры". ISSN 1684-9876 Rambler's Top100 Яндекс цитирования